提及多因子的定量檢測，越來越多的小伙伴會第一個想到 Luminex 技術。Luminex 基于微球設計原理，可以在 1 張 96 孔板中定量檢測多達 100 種分析物，僅需少量樣本，節約時間、經費，可謂一舉多得。

R&D Systems? 擁有 Luminex Assay 以及 Luminex High Performance Assay 兩個產品系列，均基于帶有顏色編碼的微球，這些微球表面包被了識別不同目標分析物的特異性抗體。當預包被的微球與待檢樣本孵育時，分析物被微球捕獲，經由生物素標記的特異性檢測抗體混合物識別，加入鏈霉親和素 - PE 熒光素底物后發光并進行定量檢測。

01  樣品粘稠，未有效稀釋
解決方法：測定前，如果是凍存的血清 / 血漿樣品，第一步需將樣品充分解凍（如果樣本包含碎片的話也會影響數據的讀取）。建議在加樣前，將樣本進行 16,000 x g 離心 4 分鐘，特殊情況下可能要離心更長的時間，再用 Calibrator diluent 按照建議的稀釋比對樣本進行稀釋。

02  進樣針孔堵塞，進樣針高度不正確
解決方法：以上兩種情況都會導致沒有充足的微球進入，前者需用超聲的方法清洗針孔，如有需要進行替換；后者需確定進樣針的高度并調整至合適位置。

也可以進入維護頁面，點擊 Cmds&Routines，使用 0.1 N NaOH 運行深度清洗。

03  操作有誤，清洗步驟中孔板未附磁力架
解決方法：這是新手常常會出現的失誤。對于磁珠形式的微球，切記清洗時整個過程都要附有磁力架，確定磁力架正確地結合在微孔板上，洗板時磁力架應置于微孔板底部，棄去洗滌液前應靜置 1 分鐘。不要吸干，以防止磁珠丟失。

如果磁珠數量少，建議最好不要用自動洗板機清洗，我們發現自動洗板機清洗可能會造成磁珠聚集，從而影響其數量。

?在實際的 Luminex 實驗操作中，有客戶經常碰到微球數少于 50 個甚至只有幾個的問題，極大地影響了實驗結果，其可能的原因和解決方法有哪些呢？

如下為正確的手動洗板方式：

除了上述三點外，還要一些細節需要注意

●確保儀器已正確校準，建議每周進行儀器校準，每天驗證一次。若儀器使用頻率不高，則需要在每次實驗前進行校準和驗證；

●在實驗當天使用驗證試劑盒確定儀器功能運行正常；

●設定微球收集數（events/microparticle）為 50，并選擇正確的微球類型（通常為磁珠），保證微球數量收集充分以獲得準確的統計學結果；

●使用 0.12" orbit（3mm 軌道半徑）水平微孔板振蕩器，確保振蕩器速度符合說明書要求。

以上文字和圖片來源于Bio-techne